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Veterinaria Tropical. 1: 3-14. 1976
ULTIMAS OBSERVACIONES SOBRE EL COMPORTAMIENTO DE LAS VACUNAS JUVENAL
BALESTRINI C.*, CARLOS BERNAL L.**, JESÚS M. JIMÉNEZ
C.*, *Instituto de Investigaciones
Veterinarias |
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INTRODUCCIÓN Confirmada la ruptura de inmunidad en agosto de 1966, en momentos en que se aplicaba en el campo la vacuna antiaftosa atenuada, con la cepa "O" Lara (O3), pase 163, adaptada en pollitos de un día de edad, fue necesario producir material inmunizante con la cepa "O" Campos (O1) pase 73 en embriones de 14 días, perteneciente al Centro Panamericano de Fiebre Aftosa (C.P.F.A. ). Hasta el momento sólo se conocía el subtipo O3 y en el año de 1966 hizo su aparición el subtipo O1. En el año de 1967 se diagnostica el virus subtipo "A"27 en Colombia y previendo la posibilidad de una infección a Venezuela se procede a realizar un trabajo conjunto entre el Centro Panamericano de Fiebre Aftosa y el Instituto de Investigaciones Veterinarias, para determinar cuál sería el grado de protección del virus vivo modificado "A"24 Cruzeiro frente al nuevo subtipo. Posteriormente, en los primeros meses del año 1970, hace también su aparición el virus subtipo "A"32, con lo cual se abren nuevas investigaciones para conocer cuál sería la protección conferida a los bovinos por las vacunas modificadas frente al nuevo subtipo. orientados hacia una fórmula que simplificara el proceso de vacunación y redujera el costo de la misma, se inició en escala industrial el uso de la vacuna bivalente, cepas "O", Campos ( adaptada en embriones de pollo de 14 días con un pase industrial en ratones lactantes de cuatro días y "A" 24 Cruzeiro pase 82 en embriones de pollos de 14 días), que se venía usando en el país desde el año de 1962. Con esta finalidad se iniciaron una serie de experiencias en bovinos para tratar de conocer el valor antigénico de las cepas antes mencionadas, así como el de las cepas "O" J, Pessoa pasaje N° 24, "O" J, Pessoa pasaje 13-RF -B9-BHK traídas del Centro Panamericano de Fiebre Aftosa y la de "O" Lara pase 163 aplicadas tanto en primovacunación como en revacunación en forma monovalente y bivalente. La finalidad de todas estas experiencias era conocer el grado de patogenicidad de las muestras empleadas y su antigenicidad frente al virus tipo O1, actualmente en el campo, tomándose como virus de confrontación la muestra "O" Cura II pasaje en bovinos ("O" Cura 66) .
Se efectuaron una serie de experiencias para determinar los factores que están comprometidos en el comportamiento de las vacunas a virus vivo modificado en los últimos años. En el transcurso de estas experiencias se utilizaron alrededor de 350 bovinos susceptibles entre 18 y 24 meses de edad, procedentes de una finca del Estado Bolívar, donde nunca se han presentado brotes de Fiebre Aftosa. Durante el desarrollo de estas experiencias se efectuaron pruebas de : vacunación, titulaciones de virus y vacunas, estudios de niveles de anticuerpos y control de eficacia. Control de patogenicidad Se estudiaron 28 lotes de vacunas inoculando 2 ml. (vacunas monovalentes) y 4 ó 5 ml. para vacunas bivalentes por vía I.M. Los bovinos fueron sangrados a los 0 días, ya los 21 y 30 de vacunados, para el estudio de niveles de anticuerpos. Los materiales recolectados de lesiones post-vacunales, fueron enviados a Serología para su confirmación. Los resultados obtenidos siempre fijaron el virus correspondiente de las pruebas en curso. Titulación de virus y vacunas En ratones lactantes, la inoculación para titulación se efectuó según las recomendaciones de SKINNER ( 5) empleando 0,05 ml. de inoculum y 8 ratones por dilución. Los cálculos 50% punto final se hicieron según el método de REED y MUENCH (6). Estudios de niveles de anticuerpos Se efectuaron por pruebas de seroprotección según trabajo de CUNHA y col. ( 1) empleando ratones lactantes de 7 días de edad. Control de eficacia Se efectuó en bovinos por vía I.D.L .según métodos de HENDERSON (4), y algunos casos el método de LUCAM (Índice K) (7) modificado por el C.P.F.A. Los virus empleados en estas pruebas fueron: En cada una de estas experiencias se utilizaron 4 bovinos testigos y los materiales recolectados de reacciones primarias (locales), como secundarias (podales), siempre fueron tipificadas para su correspondiente diferenciación. RESULTADOS 1. Vacunas monovalentes O1 Campos y O3 Lara y su comportamiento frente al virus O1 Cura 71 y O1 Carora 71. Nuestros resultados, que se pueden ver en el Cuadro 1, indican que en bovinos susceptibles inoculados con vacunas elaboradas con las cepas O1 J. Pessoa RL5-E24-cor .; O1 J. Pessoa RL5-E3-RFB9-BHK2 traídos del C.P.F.A., a pesar de haberse empleado 107'3 DL50 y con una patogenicidad de 1/6 y 0/6 dieron una protección de 50 y 16% frente al virus O1 Cura 66 actuante en el campo. De igual manera se puede observar que vacunas elaboradas con las cepas O3 Lara P. 163 cor. 1/10 y O3 Lara P. 163 cor. 1/20, con 107'5 y 107'7 DL50% y una patogenicidad de 1/10 y 0/8 produjeron una protección de 20 y 0% (baja) frente al virus O1 Cura 66. Por el contrario las vacunas elaboradas con la muestra O1ca. RL4 BE72 cor. con 106'4 y 107'7 DL50% y con una patogenicidad de 6/18 (33%) usándose 3 diluciones, la protección fue de 80-66 y 83.3% frente al virus O1 Cura 66.
2. Vacunas monovalentes elaboradas con virus "A"24 y su comportamiento frente al virus "A"27. En este ensayo se pudo observar que cuando se usó el pase AE80 con 107'20 DL y 106'57 por dosis con una patogenicidad 5/8 (62%), la protección fue de 75% frente al virus subtipo "A" 27, En cambio, cuando se utilizó el pase 92 con DL50 por dosis de 7,42 y 6,64 con una patogenicidad de 1/8 (12,5%) y 0/8 (0%) la protección fue de 37,5% y 12,5 (muy baja), (Ver Cuadro 2). 3. Vacunas bivalentes modificadas elaboradas con virus "O" Campos y "A"24 y su comportamiento frente al virus O1 Cura 71 y 01 Carora 71. En lo que respecta a las vacunas bivalentes oca E73 RL + AE79 RL y Oca-E73 RL + AE79 RL con 104'60 DL50% para ambas y una patogenicidad de 0/9 y 0/10, la protección fue de 1/9 (11%) 3/10 (30% ). on la muestra de vacuna bivalente AE80 clon y Oca72 aplicando 105'22 DL50% por dosis con una patogenicidad 1/16, la protección fue de 8/8 (100%). (Ver Cuadro 3). 4. Vacunas monovalente elaboradas con virus "A"24, comportamiento frente al virus "A"32. En experiencias con 3 lotes de vacunas monovalente
pare AE79-RL aplicando 106'79 y 106'79 DL50% con
una patogenicidad 1/8 (12,5%) 2/8 (25%) y 2/8 (25%), la protección fue
de 7/8 (87,5%) 8/8 (100%) Con la vacuna AE80 clon 3 en tres experiencias donde se aplicaron 108'0- 107'37 y 107'20 DL50% con una patogenicidad de 0/8 (0%) para las dos primeras y 1/8 para la tercera, la protección fue 6/8 (75%) y 7/8 (87.5%) para las dos últimas, (Ver Cuadro 4). 5. Vacunas bivalentes elaboradas con virus "A"24 y "O" Campos, comportamiento frente al virus "A"32.
DISCUSIÓN De los resultados expuestos en el presente trabajo podemos deducir que vacunas antiaftosas a virus vivo modificado comprobadas frente a virus homólogos o del mismo subtipo generan inmunidad satisfactoria como en el caso de la vacuna elaborada con la cepa O1 Campos cuando se confronta con el subtipo O1 actuante en el campo venezolano. Las vacunas elaboradas con cepas diferentes a las presentes en los brotes de campo no producen una buena protección cuando se exponen con estos virus de calle, como ha sido el caso de la vacuna producida en Venezuela a escala industrial hasta el año 1966 la cual se elaboraba con el subtipo O3 Lara que no confería protección frente al virus O1 Cura 66. Al mismo tiempo, la vacuna a virus vivo modificado producida con el subtipo "A"24 Cruzeiro pasajes 79, 80, 81 y 82 fue capaz de dar sólida protección frente al subtipo "A"27 Colombia, sin embargo cuando se usó el pasaje 92 y se expuso frente al mismo virus, la protección obtenida fue baja. Esta misma vacuna de "A"24, empleando los pasajes 79 y 80 en embriones fue capaz de proteger frente al subtipo "A"32 siempre y cuando se usen altas concentraciones de virus vacunal. En nuestro trabajo observamos que cuando se presentan reacciones post-vacunales, la vacuna genera buena inmunidad, indicando con esto que es una inmunidad de convalescencia. Esta característica no es muy favorable para su uso a campo, debido a los problemas post-vacunales en animales primovacunados, lo cual se presenta con mucho más frecuencia en los bovinos vacunados que reaccionan con lesiones en patas, y pocas veces con lesiones bucal es. Es el subtipo O1 el que presenta mayor inconveniente ya que cuando se inocula en forma bivalente siempre predomina sobre el virus "A" 24. RESUMEN En el presente trabajo, se ha estudiado el comportamiento de las vacunas antiaftosa a virus vivo modificado tipos "A" y "O", utilizando cepas vacunales 01 Campos, 01 -T. Pessoa, O3 Lara, así como la cepa "A "24 Cruzeiro frente a los subtipos O1 Cura 66 y O1 Cura 7- 01 Carora 71, "A" 27 y "A"32 actuantes en el campo. La finalidad de estas investigaciones, es la de conocer el grado de patogenicidad y la inmunidad conferidas por estas vacunas. Se estudiaron 28 lotes de vacunas. Las vacunas elaboradas con virus O1 Campos ofrecieron buena protección frente a los virus de comprobación aunque la patogenicidad era aún alta . Cuando se emplearon otras cepas vacunales tales como: O1 J. Pessoa y O3 Lara, se observó que la patogenicidad era muy baja y la inmunidad conferida deficiente, encontrándose que sólo un lote alcanzó un 50% de protección. Las vacunas elaboradas con virus "A"24 Cruzeiro pases 79-80-81 y 82 presentaron cierto grado de patogenicidad pero buena inmunidad frente a los subtipos "A"27 y "A"32. El pase 92 del virus "A"24 Cruzeiro presentó baja patogenicidad pero la inmunidad conferida fue deficiente. Se observó que cuando las dosis infectantes 50% del virus contenidas en las vacunas, eran altas, había mayor patogenicidad pero mejor inmunidad. SUMMARY The efficacy of Foot and Mouth Disease (F.M.D.) live virus vaccine were studied using Types "O" and "A" viruses. The strains of Type "O" virus were O1 campos (Brazil), O1 Pessoa (Brasil) and O3 Lara (Venezuela) and they were challenged with subtypes O1 cura 66, O1 cura 71 and O1 Carora 71, all of them Venezuelan field strains . When the O1 campos Vaccine had 10 6'5 LD50/dose of virus, a good proteccion was achieved in the bovines. However post vaccination reaction were as high as 37% in one experiment and 33% in another one. Vaccines that were prepared with O1 Pessoa and O3 Lara strains, although had lower pathogenicity for bovines did not protect against the challenge virus . Only one Pessoa strain vaccine lot reached 50% protection when exposed to O1 Cura 66 field strain. Vaccines prepared with type A virus, subtype "A"24 Cruzeiro (Brasil) which had 79-80-81 and 82 chicken embryos passages had lower pathogenicity than those from O1 campos strains and at the same time were effective against challenge with subtypes "A"27 (Colombia) and "A"32 (Venezuela ) . It was observed that there was high pathogenicity rate when the 50% infectious dose of the vaccine was high although subtype "A"24 was less pathogenic than O1Campos . BIBLIOGRAFÍA 1. CUNHA, R. O., BAPTISTA, J. A. JR., SERRANO, U. M. y TORTURELLA. El uso de ratones lactantes en la evolución de los anticuerpos contra el virus de la Fiebre Aftosa y su significación inmunológica. Oac. Vet. 19 ( 110) : 243-267. 1975. 2. BERNAL, C., CUNHA, R. O., HONIGMAN, M. N. y OÓMEZ, I. Estudio sobre la modificación de una cepa de virus de Fiebre Aftosa (tipo .'A" Vallée) y su utilización como vacuna. En Congreso Panamericano de Medicina Veterinaria y Zootecnia 59, Memorias. I, 42-58. 1966. 3. PALACIOS, C. Estudio sobre vacunas de virus vivo contra la Fiebre Aftosa . Boletín de la Oficina Sanitaria Panamericana. Vol. 64, N9 5, mayo 1968. 4. HENDERSON, W. M. 1949. The Cuantitative Study of Foot and Mouth disease virus A. R .C .Repvar Series N9 8 .Agricultural Research Council. London H. M. Stationery Office. 5. SKINNER, H. H. One Week Old White mice as test animal in Foot and Mouth disease research. XVth International Veterinary Congress, Stockholm, aug. 915, 1953. 6. REED, J. J. and MUENCH, H. A simple method of Stimating 50% end points. Amer. J. Hyg., 27,439-497. 1938. 7. LUCAM, F. and FEDIDA, M. Une nouvelle methode quantitative poor 1'appreciation de l'inmunite anti-apteux. Bull. off. Int. Epiz .49, 596-621. 1958. |
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