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Veterinaria Trop. 20:109-119. 1995. SUSCEPTIBILIDAD
A LOS ANTIMICROBIANOS y TIPOS CAPSULARES DE Pasteurella
multocida
Yuraima
Pineda*, Aura G. de López*, Antonia Clavijo*, *FONAIAP. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. |
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RESUMEN Un total de 135 cepas de Pasteurella multocida aisladas de la cavidad nasal, cornetes y pulmones con lesiones neumónicas de cerdos, en un período de cuatro años, fueron analizadas para conocer su susceptibilidad frente a 17 agentes antimicrobianos. El 100% de las cepas presentaron resistencia múltiple con patrones de resistencia que oscilaron de dos a once marcadores. La más alta resistencia fue para Jincomicina, triple solfa y estreptomicina en los serotipos capsulares A y D. Los aislamientos fueron altamente susceptibles ceptiofur , cefalotín, colimicina, polimixina y cloranfenicol. INTRODUCCIÓN Pasteurella multocida es comúnmente aisladas del tracto respiratorio del cerdo. Ha sido reconocida como el agente etiológico del complejo de la neumonía crónica porcina, complicando la neumonía iniciada por Micoplasma hyopneumoniae y Actinobacilus pleuropneumoniae (12). P. multocida y Bordetella brochiseptica son considerados los agentes causales de la rinitis atrófica porcina, demostrándose que serogrupos A y D de los cinco serogrupos capsulares de P. multocida están implicados en esta enfermedad (5). Los agentes antimicrobianos son utilizados para tratar o prevenir enfermedades infecciosas. Sin embargo, el uso de estos agentes determina presión selectiva en los genes que codifican resistencia a los antimicrobianos. Durante los últimos años, estudios al respecto han señalado resistencia a antimicrobianos de importancia clínica en aislamientos de P. multocida de origen animal (4, 7, 12, 14). Con especial referencia a estreptomicina, sulfonamidas, tetraciclinas y B lactámicos, lo que se demostró estar codificados en plásmidos R (5, 7, 9, 11, 12). La naturaleza infecciosa de la resistencia a los antimicrobianos en las bacterias patógenas ha determinado la necesidad de mantener una vigilancia periódica o continua de los patrones de resistencia, lo que representa una valiosa ayuda al momento de implementar tratamientos adecuados. Existen pocos reportes de la prevalencia de cepas de P. multocida resistentes a los antimicrobianos asociada con enfermedad del tracto respiratorio y rinitis atrófica del cerdo por lo cual el propósito de este estudio fue caracterizar los aislamientos de P. multocida obtenidos del tracto respiratorio de cerdos durante los años 1990 -1993 y determinar su comportamiento frente a 17 agentes antimicrobianos. MATERIALES Y MÉTODOS Entre 1990 y 1993, se procesaron 495 muestras, de pulmones (378), hisopados de cavidad nasal (27) y cometes (90) de cerdos en etapa de desarrollo, con enfermedad respiratoria en el laboratorio de Bacteriología del Instituto de Investigaciones Veterinarias CENIAP-FONAIAP , provenientes en su mayoría de la región central de Venezuela. Cepas de Pasteurella. Se aislaron un total de 135 cepas de P. multocida utilizando métodos bacteriológicos convencionales, se les detectó los antígenos capsulares A y D por las pruebas de decapsulación con hialuronidae y floculación con acriflavina respectivamente (3, 2). Pruebas de susceptibilidad a los antimicrobianos. El perfil de la susceptibilidad a los antimicrobianos de las cepas de P. multocida fue determinado frente a 17 antimicrobianos, por la técnica de difusión en agar con discos descrita por Bauer et al. (1). El inóculo consistió de un cultivo puro de cada cepa a una concentración similar a un patrón de Mc. Farland No.1 crecido en agar tripticasa soya a 37 °C por 18 horas. La susceptibilidad se determinó por medida del diámetro de la zona de inhibición. Los antimicrobianos utilizados y sus concentraciones fueron ácido nalidíxico (An =30 .mg); ampicilina (Am = 10. mg); cefalotina (Ce =30.mg ); ceftiofur (Cf =30) .mg; colimicina (Co = 10.mg);cloranfenicol (Cl =30 .mg); eritromicina (Er = 15.mg ); estreptomicina (Es = 10.mg); gentamicina (Gm = 10 .mg); Kanamicina (Km = 30.mg); lincomicina (Lm = .mg); neomicina (Nm = 30.mg); penicilina (Pn = 10unid); polimixina (PB = 300- unid); tetraciclina (Te = 30.mg ); trimetoprim-sulfametoxazol(Tsx = 25.mg) y triple-sulfa (Ts = 300.mg ). RESULTADOS Y DISCUSIÓN La frecuencia de aislamiento y el serotipo capsular de las Pasteurelas se presenta en el Cuadro 1. Todos los aislamientos de P. multocida fueron claramente identificados como A o D según sus antígenos capsulares. El serotipo A fue detectado en 68 cepas (50,37%) y el D en 67 cepas (49,63%), la frecuencia de aislamiento fue mayor de cometes, seguido por aislamiento de cavidad nasal y pulmones neumónicos, la proporción de cepas serotipos A fue más prevalente en pulmones con pulmonía lo que coincide con lo observado por otros autores (8, 17). Por el contrario el serotipo D fue aislado en alta frecuencia de cometes en casos de rinitis atrófica similar a lo expresado en otras investigaciones (6,7).
Durante los últimos años la resistencia de cepas de P. multocida a los antimicrobianos de importancia clínica ha sido señalada (4,5, 12, 14, 16). Nuestros resultados revelan que el 100% de las cepas presentaron resistencia múltiple con patrones de resistencia que oscilaron de dos hasta once marcadores simultáneamente. Los frecuentes incluyeron resistencia para antimicrobianos (Lm, Ts) que representa el 14% para ambos serotipos seguido de seis marcadores (Er, Es, Lm, Pn, Te, Ts) con una frecuencia del 12% para el serotipo A. Continuando con patrones de siete hasta once marcadores con frecuencia entre 5% y 7% (Cuadro 2). Estos hallazgos revelan que predomina una resistencia múltiple para ambos serotipos, resultados similares han sido encontrados por Corboz el al. (4) en el 97% de aislamientos de P. multocida en cerdos entre 1986 y 1992 igualmente Ishii el al. (12) entre 1987 y 1989.
La evolución de la resistencia para cada serotipo entre 1990-1993 aparece representada en los Cuadros 3 y 4. En forma general la resistencia a la mayoría de los antimicrobianos analizados se ha incrementado a lo largo de este período de tiempo, probablemente como consecuencia de su uso indiscriminado en la industria porcina. En casos específicos como las sulfonamidas se ha mantenido elevada, mientras que para estreptomicina ha sido variable, y referente a lincomicina parece comenzar a disminuir. Estos resultados son comparables con datos similares de la literatura (4, 7, 12).
Resultados de la resistencia total individual para cada serotipo son presentados en los Cuadros 5 y 6. Se observó para ambos serotipos una alta resistencia para lincomicina, estreptomicina y triple solfa, para el serotipo A con frecuencias de 98,5% a lincomicina seguido de 82,4% a triple solfa y 75% a estreptomicina; para el serotipo D se observaron frecuencias de 89,6% a lincomicina, 87% triple sulfa y 71,6% estreptomicina. Estos datos coinciden con diferentes trabajos (4, 7, 12, 13, 14, 16) con excepci6n de la altísima resistencia observada para lincomicina que es similar a lo señalado por Corboz et al. (4). Niveles de resistencia altos aunque en menor proporción fueron también observados para eritromicina, neomicina, penicilina y tetraciclina. Lo que podía estar relacionado al uso ampliamente difundido de estos agentes en Medicina Veterinaria. Como es el caso del uso de sulfonamidas en el agua de consumo para cerdos, así como el uso parenteral de combinaciones de penicilina-estreptomicina ha contribuido en la aparición de cepas resistentes (5); igual situación se presenta con el uso de oxitetraciclina contra Bordetella bronchiseptica para el control de la rinitis atrófica con emergencia de cepas de P. multocida D resistentes, por lo que un agente puede ser controlado, pero el otro no (7).
La resistencia mediada por plásmidos no ha sido comúnmente observada en cepas de P. multocida. Sin embargo, en los últimos años se ha demostrado en aislamientos de P. multocida que la resistencia a estreptomicina y sulfonamidas es codificada por plásmidos (5, 11, 18) y que estos confieren la misma resistencia para E. coli, Salmonella panáma y los serotipos capsulares A y D de P. multocida lo que sugiere la posibilidad de una transferencia in vivo de estos plásmidos entre bacterias de diferentes familias por vía conjugativa, así como el mantenimiento de esta resistencia en el ambiente porcino (5, 18). Condición que pudiera estar ocurriendo en las cepas de P. multocida analizadas si consideramos los reportes realizados por Pineda et al. (15) al detectar en cepas de E. coli porcino, de estas mismas granjas, plásmidos conjugativos que confieren resistencia para estos mismos marcadores. Aunque las cepas no exhibieron 100% de suceptibilidad, se observó que los antimicrobianos con más alta actividad fueron ceftiofur y cefalotin para ambos serotipos seguido por colimicina, polimixina B y cloranfenicol (Cuadro 5 y 6). Estos resultados coinciden con lo señalado por otros autores (4, 7, 12, 13, 16, 17). La susceptibilidad observada para estos antimicrobianos puede deberse a un uso difundido en estas explotaciones, bien por el costo como en el caso de las cefalosporinas o por la escasa disponibilidad para uso veterinario como ocurre con la colimicina y polimixina, en cuanto al cloranfenicol por sus altos riesgos y efectos colaterales. Nuestros resultados reflejan que a través de estos años la resistencia para la mayoría de los antimicrobianos analizados en cepas de P. multocida se ha incrementado por lo que se hace necesario un uso adecuado de los mismos para lograr un efectivo tratamiento contra las infecciones causadas por P. multocida. SUMMARY A total of 135 strains of Pasteurella multocida isolated from the nasal cavity, turbinates and pneumonic lung lesions of swine over a 4 years period were tested for antimicrobial susceptibility against 17 antimicrobial agents. It was found that 100% of strains showing multiple resistance, with pattern from 2 to 11 markers. The highest resistance were for lincomycine, streptomycin and triple sulfa in the capsular serotypes A and D. The isolates were highly susceptible to ceftiofur , cephalothin, colistin, polymixin B and chloramphenicol. BIBLIOGRAFÍA
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