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Veterinaria Tropical. 22(2): 147-153. 1997 TÍTULOS DE ANTICUERPOS SERONEUTRALIZANTES EN CERDOS VACUNADOS CON UNA Y DOS DOSIS DE UNA VACUNA INACTIVADA CONTRA LA PSEUDORRABIA Nelly Candelo de Arriojas* y José Obregón*
* Investigadores. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias. |
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RESUMEN Se estudiaron los efectos de la vacunación con una y dos dosis, de una vacuna comercial contra el virus de la pseudorrabia, inactivada, en 69 cerdos de 10 semanas de edad, divididos en tres grupos. La protección fue evaluada comparando los títulos de anticuerpos desarrollados después de la aplicación de la vacuna hasta la edad de matadero. La prueba serológica utilizada fue la seroneutralización. En este estudio los títulos de anticuerpos desarrollados, revelaron un aumento de los mismos en el grupo de animales que recibió dos dosis de vacuna, superior al grupo que se le aplicó una dosis (P<0,01). Palabras Clave: Pseudorrabia; vacuna; virus. INTRODUCCIÓN El uso de vacunas contra el virus de la pseudorrabia (VPR) ha reducido en forma significativa las pérdidas económicas que origina la enfermedad en las granjas porcinas, ya que previene la forma severa de ésta y la muerte de los animales (MENGELIN y PIRTLE, 1990; MONTE et al., 1995). Sin embargo, el virus continua circulando en el rebaño y la aplicación de la vacuna contra el virus sólo minimiza la cantidad de virus en circulación, permitiendo una disminución del número de animales infectados en forma latente, por lo tanto no impide el establecimiento de infecciones latentes, aunque reduce en gran medida los casos clínicos y excreción de virus (MAES, 1991). Las vacunas contra la VPR que se emplean en la actualidad incluyen vacunas a virus vivo e inactivadas clásicas, vacuna con marcador serológicos, subunidades glicoproteicas y mutantes de deleción obtenidas por ingeniería genética. Las vacunas vivas desarrollan una respuesta eminentemente celular y local; las inactivadas una respuesta humoral (MOLITOR y TAWLEY, 1987). El control y la erradicación de la VPR va a depender del uso de una vacuna que pueda inducir una respuesta inmunológica eficaz que prevenga o minimice la transmisión del VPR entre animales (EIRAS et al., 1993). El objetivo de este trabajos fue demostrar los títulos de anticuerpos desarrollados por animales de diez semanas de edad, al aplicárseles una vacuna de virus inactivado, utilizándose una y dos dosis vacunales. MATERIALES Y MÉTODOS Animales de experimentación Para el estudio realizado se utilizaron cerdos de 10 semanas de edad, raza mestizo (yorshire x landrace). El trabajo se llevó a cabo en una granja comercial ubicada en el estado Carabobo. El grupo experimental estuvo conformado por 69 animales, los cuales fueron divididos en tres grupos formados por 23 animales cada uno. Al grupo A se le administraron dos dosis de vacuna a la edad de 10 y 13 semanas, al grupo B le fue aplicada una sola dosis a las 10 semanas, y el grupo C correspondió al grupo testigo. Medida de la respuesta inmunológica A cada cerdo de los grupos A y B se les aplicó 2ml de la vacuna vía intramuscular. Se tomaron muestras de sangre, antes de la primera vacunación y luego cada 21 días hasta la edad de 23 semanas (91 d postvacunación) a los 69 animales. Los sueros fueron extraídos e inactivados a 56 °C por 30' para ser almacenados a -20 °C y más tarde se procesaron a nivel de laboratorio utilizando la prueba de seroneutralización (SN). Virus y vacunas de ensayo Virus de la VPR fueron replicados en células Yero obteniéndose una masa elevada de antígeno viral, el cual en el lote utilizado, alcanzó títulos de 10 4,6/ml DICC-50, suficiente para ser usado en el ensayo serológico como antígeno de referencia. Como inmunógeno se utilizó una vacuna comercial inactivada marca NORDEN cepa Norden que se originó de la cepa de campo Bucharest (BUK), comprada a una casa comercial. Se confrontaron diluciones dobles seriadas de sueros problemas en medio de Eagle, desde 1:2 hasta 1:128, con 100 DICC-50 (antígeno de referencia), por un período de 1 h a 37 °C. Seguidamente se adicionó suspensión de células Yero a una concentración de 500.000 cel/ml con 10% de suero fetal bovino. Se incorporaron sueros positivos y negativos de referencia, así como control de células y sueros de campo. En cada prueba se incluyó una titulación simultánea para corroborar el número de dosis infecciosas utilizadas. Todos los volúmenes se ajustaron a 50 ml y la lectura de la prueba se realizó después de un período de incubación de 96 h en estufa de CO2 al 5% a 37 °C. Análisis estadístico Los resultados obtenidos con las variables (dosis y días) estudiadas por grupo de animales fueron agrupadas e interpretados mediante el método de análisis de varianza determinándose, por la prueba de F, sí existía o no diferencia significativa en los diferentes grupos. El nivel de significación utilizados fue de 1%. RESULTADOS Y DlSCUSIÓN El Cuadro 1 expresa el análisis de varianza de los datos obtenidos en la prueba de SN observándose que las diferencias entre el número de dosis días postvacunales y la interacción de estos, son altamente significativos (P<0,01).
En el Cuadro 2 se muestra la respuesta de anticuerpos en cerdos vacunados con una y dos dosis de vacuna contra el VPR, determinados mediante la prueba de SN. El día cero que corresponde al día que se les aplica la primera dosis vacunal a los cerdos, se observa que hay animales de cada grupo que presentan anticuerpos contra el VPR, con títulos hasta 1:8. A los 21 d postvacunaci6n existe un incremento significativo de los títulos de anticuerpos tanto para el grupo A como para el grupo B, los títulos alcanzaron valores de 1:8 y 1:16, respectivamente. En este momento el grupo A recibe el refuerzo o segunda dosis de vacuna. Posteriormente a los 42 d los animales del grupo A incrementan los títulos de anticuerpos alcanzando hasta 1:64; los animales del grupo B sufren un descenso en los títulos, aumentando el número de cerdos con títulos menores de 1:2. Al cumplirse los 63 d en los animales del grupo A descienden los títulos de anticuerpos hasta 1:16, pero los del grupo B continúan bajando y aumentando el número de animales con títulos menores de 1:2. A los 91 d los animales del grupo A se mantienen con títulos desde 1:2 hasta 1:16, no así en el grupo B, donde todos los animales resultaron con títulos menores 1:2. Los animales testigos o que no recibieron tratamiento, fueron negativos todos, a partir de los 21 d, ya que tres animales resultaron con presencia de títulos de 1:2 y 1:4 el día cero.
En el experimento se constataron diferencias significativas entre los dos grupos vacunados contra el VPR. La administración de una y dos dosis de vacuna, indujo una respuesta inmunogénica humoral. Sin embargo hubo diferencia. En el grupo que recibió las dos dosis, los títulos de anticuerpos detectados por la prueba de SN en los diferentes días en que se realizaron las sangría, alcanzaron valores de 1:64, no así para el grupo al cual se le administró una dosis. Resultados que coinciden con los obtenidos por VAN OIRSHOT y GIELKENS (1984). Los títulos de anticuerpos desarrollados por el efecto de una dosis alcanzaron sólo valores hasta 1:8 sufriendo una disminución tan acentuada, que para el momento del sacrificio todos los animales presentaron títulos menores de 1:2. Esto indica que con dos dosis vacunales se produce una buena respuesta inmunitaria, lo cual disminuiría la severidad de la enfermedad y reducirá la mortalidad por la infección de VPR (MOCK et al., 1981), probablemente debido a la reducción de la multiplicación del VPR en los órganos del animal (VAN OIRSHOT, 1988). También se reduce el grado de predisposición a los agentes secundarios como bacterias y otros virus ya que se ha demostrado que el VPR, al tener la oportunidad de multiplicarse en el sistema fagocitario mononuclear, conduce a una disminución de las defensas del animal presdisponiéndolo al ataque de otros agentes patógenos (PENSAERT et al., 1991). El estudio de los títulos de anticuerpos desarrollados por el efecto de la vacuna arrojó los resultados esperados, ya que se obtuvo seroconversión. Sin embargo fue solamente altamente significativo cuando se aplicaron dos dosis vacunales, resultados que coinciden con los obtenidos por ARRIOJAS et al. ( 1992). SUMMARY The effects of vaccination with one and two dosis of comercial inactivated pseudorabie disease virus (PRV) vaccine were studied in 69 pigs of ten weeks old, their were divided in three group. The serologic test used was Seroneutralization. In this study the titers of antibodies were high in the group of pigs who received two dosis of vaccine than the group of pig who received only one dosis (P< 0.01 ). Key Words: Pseudorabie; vaccine; virus. BIBLIOGRAFIA ARRIOJAS, N., J. CASTAÑEDA, G. ERICKSON, E. SOGBE y J. OBREGON. 1992. Respuesta serológica en cerdos vacunados contra pseudorrabia, utilizando una vacuna con ausencia de la glicoproteina GI. Revista de FCV -UCV. 38(1-8):167-178 EIRAS, A. PUENTE y J. REGUEIRO. 1993. Vacunas frente a la enfermedad de Aujeszky. Tratado de ganado Porcino. Marzo 14, 79-89. MAES, R. K. 1991. Pseudorabies virus latency. First International Symposium on the erradication on pseudorabie (Aujeszks virus). May 19-22. St. Paul Minnesota U. S. A. MENGELIN, W .L. and E. PIRTLE. 1990. Sequencial change on the humoral Inmune response of pigs to pseudorabie virus after vaccination, exposure to virulent virus and reactivation fo latent virus. J. Vet. Diag. Invest. 2:35-43. MOLITORT. and D. TAWLEY.1987. Pseudorabiesvaccine: Past, present and future Compend. Contin. Educ. Pract. Vet. 9(2):409-416. MOCK, R. E., R. A. CRANDEL and G. M. MESFIN. 1981. Induce latency in pseudorabies virus vaccinated pigs. Can. J. Comp. Med. 45:56-59. MONTE, B., L. McCAW, Y. JINSHENS and M. T. CORREA. 1995. SurvivaI of pseudorabies virus on swabs maintained under standar field sample shipping condition J.Diagn Invest. 7:56-59. PENSAERT, M., H. NAUWYNCK and K. DESMET. 1991. Pathogenesis of pseudorabie virus (PR V) infection in swine with reference to control and erradication. First International Symposium on the erradication of pseudorabies (Aujeszkys virus) May 19-22 St. Paul Minnesota U.S.A. p. 2-3. VAN OIRSHOT, J. T. and A. C. GIELKENS. 1984. Intranasal vaccination of pigs againt pseudorabies: absense of vaccine virus latency and failure to prevent latency ofvirulen virus Am. J. Res. 45(10):2029-2103. VAN OIRSHOT, J. T. 1988. Induction of antibodies to glycoprotein I in pig exposure to different doses of a middly virulent strain of Aujeszkys disease virus. Vet. Record 122:599-603. |
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